🍺 Gerenciamento de Leveduras com Ágar Slant

Diluição de zinco - Primeiro passo

Como a quantidade de zinco pra usar no processo é pequena, é necessário diluí-lo em uma solução para facilitar o uso.

• 1 gr de zinco hiperhidratado em 350 ml de água

Essa solução deve ser armazenada em geladeira e pode ser usada por até 3 meses.

Usar 1m/litro para 0,6 ppm

📌 Armazenamento em tubo falcon

• 200 ml de água
• 20 gr de DME
• 4 gr de ágar ágar. Um tubete da marca Gelialgas, que é uma marca que solidifica muito bem.
• 0,2 ml de solução de zinco

🧪 Preparo do ágar slant

• Nâo precisa se preocupar com cuidado biológico pois vai ser tudo sanitizado.
• Coloque o DME e o ágar ágar na água e misture bem
• Ferva tudo por 1 ou 2 minutos
• Coloque o zinco e misture bem.
• Coloque 5 ml dentro de um tubo falcon.
• Faça isso em alguns tubos sempre misturando bem antes e coloque-os dentro de um copo ou becker.
• Coloque tudo na panela de pressão com um pouco de água (não precisa ser muito) e deixe ferver por 15 minutos.
• Passado o tempo, espere sair a pressão da panela (importante!!) antes de abri-la para equalizar tudo, senão, o tubo falcon pode explodir ou deformar. Normalmente alguns minutos, quando parar de sair vapor
• Não deixe a solução esfriar na panela senão o ágar ágar pode solidificar dentro da panela.
• Retire da panela e já coloque-os deitados para solidificar na posição desejada. A tampa vai fazer com que ele fique levemente inclinado que é o que queremos.

👉 Inoculação da levedura

Acenda a lamparina em um local onde não tenha correntes de ar. A chama tem que ficar bem estável. Ela cria uma "zona segura" (zona de convecção) em torno da lamparina. A manipulação é feita em torno da chama. Deixe a tampinha do tubo falcon em um pires com álcool. Mergulhe a alça de inoculação na levedura. De preferência, a levedura deve estar "diluída" com soro fisiológico PA, na proporção de 80 de soro para 20 de levedura feito com os mesmos procedimentos de "segurança" usados para o ágar slant. Passe na superfície do ágar em movimentos de zigue zague e feche o tubo.

Incubar até formar um bom crescimento(normalmente entre 2 e 5 dias). Fica como uma "grama" no ágar. Complete o tubo com soro fisiológico 0,9%.

Armazenar na geladeira entre 2-8°C.

A soluçã salina (soro fisiológico 0,9%) evita que o ágar resseque, reduz a disponibilidade de oxigênio, mantém as células hidratadas e dimiui a taxa de metabolismo, permitindo que a levedura permaneça viável por mais tempo.

A viabilidade aumenta muito, passando de 3 a 6 meses para 1 a 2 anos